O artigo analisa as significações de gênero no brincar livre e espontâneo de crianças em uma brinquedoteca de instituição infantil. A análise baseia-se em pesquisa etnográfica realizada com trinta e duas crianças, de ambos os sexos e idade entre quatro e cinco anos, durante o período de seis meses. Os resultados indicam que as crianças não são receptoras passivas dos significados culturalmente produzidos sobre as diferenças e identidades de gênero. Da mesma forma que reproduzem papéis e comportamentos tradicionalmente atribuídos ao masculino e ao feminino elas também desenvolvem processos de singularização que subvertem a lógica binária para além das fronteiras identitárias estabelecidas.